при
работе с

                      +

мочой  и кровью) и ArC   (в присутствии органической матрицы) либо

проводить измерения методом
стандартных добавок.

Проблемы, связанные с полиатомными ионами, вызванными матрицей
образцов, реагентов и газов плазмы, радикально устраняются при использовании
для измерений приборов с динамической реакционной системой (ДРС). В системе ДРС
используется дополнительный квадруполь - ячейка ДРС, расположенная перед
квадруполем масс-анализатора. Влияние полиатомных ионов устраняется путем их
избирательного разрушения в результате взаимодействий с молекулами нейтрального
и/или реакционного газа, напускаемого в ячейку ДРС. В качестве реакционного
газа обычно используется безводный аммиак или метан. Помимо проведения реакций,
квадруполь ячейки ДРС обеспечивает динамическое выделение узкого диапазона
пропускания интересующих ионов и препятствует продвижению паразитных продуктов
реакций к квадруполю масс-анализатора. Таким образом, система ДРС осуществляет
эффективную фильтрацию полиатомных ионов, уменьшает общий фон и увеличивает
стабильность сигналов. Эти особенности ИСП-ДРС-МС приборов позволяют достигать
лучших пределов обнаружения, уверенно определять традиционно трудные элементы
для ИСП-МС определений в органических матрицах (Si, K, Ca, Ti, V, Cr, Fe, As,
Se), а также проводить более точный изотопный анализ вещества.

Устранение и учет транспортных помех. Транспортные помехи возникают
из-за различия в вязкости и поверхностном натяжении между градуировочными
стандартами и образцами. Вязкость растворов влияет на эффективность распыления
и, как следствие, воздействует на сигнал каждого анализируемого изотопа в
растворе, в идеале пропорционального его концентрации. Вязкость водных
растворов зависит от концентрации кислоты и от концентрации матричных
компонентов. Используя довольно высокие факторы разбавления для образцов с
остаточной органической матрицей (1:300 - 1:500) и нормализуя кислотный фон в
стандартах, холостых и образцах, влияние транспортных помех можно уменьшить до
незначимого уровня. При работе с меньшими факторами разбавления (от 1:10 до
1:100 для мочи, крови и т.д.) рекомендуется убедиться в отсутствии помех,
проанализировав серию последовательных разбавлений одной пробы (например, 1:10,
1:50, 1:100, 1:200), и выбрать компромиссный фактор разбавления, при котором не
страдает чувствительность определения интересующих элементов. Если транспортные
помехи невозможно устранить, следует применить внутреннюю стандартизацию,
добавляя во все холостые пробы, стандартные растворы и образцы внутреннего
стандарта раствор Rh или In, чтобы получить конечную концентрацию во всех
растворах 10 мкг/л. Применение внутренней стандартизации также позволяет
компенсировать погрешности разбавления образцов и учесть многие матричные
влияния на плазму и поток ионов.

 

15. Градуировка масс-спектрометра

 

Калибровку спектрометра выполняют перед началом измерений
полностью подготовленных проб, используя градуировочные растворы по п. 12 при
параметрах, установленных по п. 13. Определение градуировочной зависимости,
обработка и хранение результатов калибровки выполняются программным
обеспечением спектрометра.

Проверка калибровок проводится перед началом анализа образцов.
Проверка заключается в измерении внутрилабораторного проверочного стандарта или
стандартного аттестованного образца исследуемой матрицы. Современные
программные пакеты для ИСП-МС систем позволяют задавать критерии допустимого
качества калибровок, основанные на точности и воспроизводимости результатов для
проверочных стандартов, а также на коэффициенте корреляции, и программировать
алгоритм автоматических измерений, который может включать повторные проверки
калибровок и перекалибровки без участия оператора.

Для выявления и учета дрейфа чувствительности прибора повторные
измерения проверочных стандартов и/или полные перекалибровки рекомендуется
проводить каждые 1 - 2 ч работы (через каждые 15 - 30 образцов), в зависимости
от стабильности окружающей температуры, питающего напряжения и других условий в
лаборатории.

 

16. Выполнение измерений

 

Ввод в масс-спектрометр подготовленной пробы, измерение сигналов
изотопов проводят при нормальных климатических условиях испытаний в
соответствии с п. 10 с учетом требований руководства (инструкции) по
эксплуатации прибора. Устанавливают оптимальный режим регистрации масс-спектров
и измерений в соответствии с рекомендациями производителя данного прибора.
Типичные установки рабочих параметров при измерениях приведены в Прилож. 2.
Первичная обработка сигналов и расчет концентраций проводится программным
обеспечением автоматически на основании параметров используемого метода и
данных проведенной калибровки.

Выбор изотопов для определения концентрации элементов. Для измерений
используются изотопы, наиболее предпочтительные по совокупности характеристик.
Важнейшими из них являются относительная распространенность, отсутствие или
низкий уровень спектральных полиатомных наложений, достигаемый предел
обнаружения. При отладке программного метода проводят измерения в режиме
сканирования пиков для определения возможных влияний от прилежащих пиков и
установки оптимального разрешения для каждого изотопа. Примеры выбора
оптимальных масс и достигаемых при этом пределов обнаружения приведены в
Прилож. 4.

 

17. Обработка результатов измерений

 

Аналитические сигналы обрабатываются программным обеспечением
масс-спектрометра, основываясь на построенных калибровочных линейных
регрессиях, рассчитанных методом наименьших квадратов, с учетом коррекции фона,
сигнала внутренних стандартов, а также с учетом влияния изобарных и полиатомных
спектральных наложений. Результат определения каждого элемента представляется
как среднее из нескольких (не менее двух) параллельных измерений анализируемого
образца. Обработка результатов измерений соответствует ГОСТ 8.207. Результаты
измерений отображаются на мониторе, распечатываются и/или сохраняются в виде
файла на жестком диске компьютера. Распечатанные результаты оформляют согласно
требуемому протоколу (Прилож. 5).

 

18. Внутренний оперативный контроль

 

Контроль погрешности методики производят в соответствии с ГОСТ Р
ИСО 5725-6-94. Внутренний контроль качества результатов определения
микроэлементов (сходимость, воспроизводимость, точность) осуществляют с целью
получения оперативной информации о качестве анализов и принятия при
необходимости оперативных мер по его повышению. Оперативный контроль качества
осуществляют путем проведения анализа испытуемых проб и стандартного образца,
химический состав которого не должен отличаться от состава испытуемой пробы
настолько, чтобы потребовалось изменить методику проведения анализа.

 

Оперативный контроль воспроизводимости

 

Периодичность контроля воспроизводимости результатов анализа
определяется количеством рабочих измерений за контролируемый период и
определяется планами контроля. В работе участвуют 2 аналитика. Образцами для
контроля являются представительные пробы, каждую из которых анализируют в
точном соответствии с прописью, максимально варьируя условия проведения анализа:
получают два результата, используя разные наборы мерной посуды, разные партии
реактивов и разные экземпляры стандартных образцов для градуировки прибора.

Результаты контроля признаются удовлетворительными, если
выполняется условие:

 

                      _   
_              _

                     |X  - X
| <= 0,01D x X,

                       1   
2

 

    где:

    _

    X  - результат анализа
рабочей пробы, мкг/г;

     1

    _

    X  -  результат 
анализа  этой  же 
пробы,  полученный  другим

     2

аналитиком с использованием
другого прибора,  другой мерной посуды

и другой партии реактивов,
мкг/г;

    D - допустимые расхождения между результатами анализа
одной  и

той же пробы, %.

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости
эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D выясняют
причины, приводящие к неудовлетворительным результатам работы и контроля, и
устраняют их.

 

Оперативный контроль точности

 

Периодичность контроля воспроизводимости результатов анализа определяется
количеством рабочих измерений за контролируемый период и определяется планами
контроля. Используют технику метода стандартных добавок или, при наличии
стандартных образцов состава, выполняют их анализ. Рекомендуется использовать
стандартные образцы человеческих волос, крови, сыворотки, мочи, тканей и
органов животных и растений, а также аминокислотных и поливитаминных препаратов
с микроэлементами, производимых агентствами по стандартным образцам (NCCRM -
Китай, NIST - США, IRMM - Объединенная Европа, NIES - Япония), а также
специализированными фирмами (Bio-Rad, Seronorm, Sigma-Aldrich, Merck и др.).

Метод стандартных добавок. Отбирают две пробы и к одной из них
делают добавку в виде раствора таким образом, чтобы содержание определяемого
элемента увеличилось по сравнению с исходным на 50 - 150%. Каждую пробу
анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат
анализа исходной рабочей пробы X и рабочей пробы с добавкой X'. Результаты
анализа исходной рабочей пробы X и рабочей пробы с добавкой X' получают в
строго одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик с использованием
одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.

Результаты контроля признаются удовлетворительными, если
выполняется условие:

 

                        |X'
- X - С| < К ,

                                        Д

 

    где:

    К - норматив оперативного контроля погрешности, мкг/г;

    С - добавка к пробе в виде раствора с концентрацией, мкг/г.

    При внешнем контроле (Р = 0,95) принимают:

 

                            _________________

                           /    
2          2

                   К' =  
/ДЕЛЬТА   + ДЕЛЬТА ,

                    Д  
\/       X'         X

 

              2           2

    где ДЕЛЬТА   и  ДЕЛЬТА   
-  характеристики  погрешностей  для

              X'          X

исходной пробы и пробы с
добавкой, мкг/г.

 

             ДЕЛЬТА   =
0,165 X' и ДЕЛЬТА  = 0,165 X.

                   X'                    X

 

    При внутрилабораторном контроле (Р = 0,90) принимают, что:

 

                         К' = 0,84 x К .

                          Д           Д

 

При превышении норматива оперативного контроля погрешности
эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют
причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и их
устраняют.

Метод стандартных образцов. Выполняют анализ пробы,
приготовленной из стандартного образца, по методике и сравнивают его результаты
с аттестованным содержанием элементов. Погрешность аттестации не должна быть большей
чем 1/3 погрешности методики.

Результаты контроля признаются удовлетворительными, если
выполняется условие:

 

                            _

                           |С - А| < К,

 

    где:

    _

    С - найденное содержание элемента в пробе,  приготовленной  из

стандартного образца;

    А = ДЕЛЬТА  -
аттестованное содержание элемента в 
стандартном

              А

образце.

    При внутрилабораторном контроле (Р = 0,90) принимают, что:

 

                        К = 0,84 x ДЕЛЬТА.

 

    При внешнем контроле (Р = 0,95) принимают:

 

                           К = ДЕЛЬТА,

 

    где ДЕЛЬТА - общая погрешность результата анализа по методике.

При превышении норматива оперативного контроля погрешности
эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют
причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и их
устраняют.

 

Оперативный контроль сходимости

 

Периодичность контроля сходимости результатов анализа
определяется количеством рабочих измерений за контролируемый период и определяется
планами контроля. Используют результаты параллельных анализов.

Норматив оперативного контроля сходимости рассчитывают по
формуле:

 

                        с   
- с    <= d,

                         max   
min

 

    где:

    с   , с    - наибольшее  и  наименьшее  значения 
параллельных

     max   min

определений;

    d - норматив 
оперативного  контроля  воспроизводимости,  d  =

2,77 сигма(ДЕЛЬТА),    где   
сигма(ДЕЛЬТА)    -    характеристика

составляющей случайной
составляющей погрешности.

При превышении норматива оперативного контроля погрешности
эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива выясняют
причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля, и устраняют их
путем корректирующих воздействий.

 

 

 

 

 

 

Приложе