>разогретый до 115 °С.
Выдерживают в термоблоке в течение 0,5 - 1,0

ч до гомогенизации пробы и
далее действуют, как описано в п. 10.

При работе с гомогенными водными средами, такими как моча (не
содержащая осадка), лимфа, плазма и даже цельная кровь, допускается простое
разбавление образца 2 - 3%-ной азотной кислотой непосредственно перед анализом.
Для этого к навеске образца в мерной пробирке приливается 5 - 7 мл
деионизованной воды, затем 0,3 - 0,5 мл концентрированной азотной кислоты и
проба доводится до 10 - 15 мл деионизованной водой. В этом случае не
рекомендуется уменьшать фактор разбавления пробы ниже чем 1:100 во избежание
осаждения белков, а также для компенсации высокой вязкости образцов и
склонности к пенообразованию. Пробы, растворенные таким способом, не
рекомендуется хранить до анализа долгое время (свыше суток).

Микроволновая пробоподготовка. Навеску образца по п. п. 10, 11
помещают во фторопластовый вкладыш и добавляют 5 мл азотной кислоты. Автоклав с
пробой во вкладыше помещают в микроволновую печь и разлагают пробу, используя
программу разложения, рекомендованную производителем печи. В общем случае для
мягких тканей, волос и жидкостей можно применять следующий режим нагрева:
подъем температуры до 200 °С в течение 5 мин., выдерживание в течение 5 мин.
при 200 °С, охлаждение до 45 °С. Охлажденный автоклав встряхивают для
перемешивания содержимого и приоткрывают крышку для уравновешивания давления.
Качественно разложенная проба после отгона окислов азота должна представлять
собой бесцветный или желтоватый прозрачный раствор без нерастворившихся частиц
на дне и на стенках вкладыша. Растворенную пробу количественно переносят в
пробирку объемом 15 мл, троекратно встряхивая вкладыш с крышкой с 1 мл
деионизованной воды и перенося каждый смыв в пробирку, доводят объем до 10 мл
деионизованной водой, закрывают и перемешивают. Автоматическим дозатором со
сменным наконечником отбирают аликвотную часть 1 мл и доводят до 10 мл 0,5%-ной
азотной кислотой, закрывают защитной лабораторной пленкой, передают на анализ.
Данные об объеме аликвотной части и объеме разведения вводят в программное
обеспечение спектрометра вместе с названием и навеской образца.

Допускается непосредственный отбор аликвотной части объемом 0,1 -
0,5 мл из разложенной пробы в автоклаве. Чтобы скомпенсировать при этом
погрешность разбавления, перед разложением в пробу нужно добавить раствор
внутреннего стандарта (In или Rh), чтобы концентрация внутреннего стандарта в
конечном растворе, направляемом на анализ, составляла примерно 10 мкг/л
(например, добавить в пробу 100 мкл раствора, содержащего 10 мг/л Rh, затем из
5 мл разложенной пробы взять аликвотную часть 0,5 мл и довести до 10 мл).
Раствор внутреннего стандарта необходимо добавлять во все холостые пробы и в
калибровочные растворы. Заданную концентрацию внутреннего стандарта (10 мкг/л)
в холостых и стандартных растворах необходимо точно соблюдать.

Раствор холостой пробы готовят с выполнением всех указанных выше
операций, за исключением операции взятия навески.

 

11. Разложение проб аминокислот,

поливитаминных препаратов с микроэлементами,

биологически активных добавок к пище и сырья

для их изготовления

 

Навеску измельченной пробы 0,1 - 0,2 г помещают во фторопластовый
цилиндр, приливают 1 мл концентрированной азотной кислоты, накрывают квадратом
2 x 2 лабораторной пленки и помещают в термоблок с температурой 115 °С на 0,5 -
1,0 ч до полного растворения пробы. Полученный прозрачный раствор количественно
переносят в мерную полипропиленовую пробирку, троекратно смывая со стенок
фторопластового цилиндра, и доводят деионизованной водой до 10 мл. Тщательно
закрывают кусочком защитной лабораторной пленки, перемешивают и передают на
анализ. При использовании микроволновой пробоподготовки действуют по п. 10.

Раствор холостой пробы готовят с выполнением всех указанных выше
операций, за исключением операции взятия навески.

 

12. Приготовление стандартных градуировочных
растворов

 

Рабочие стандартные растворы готовят путем смешивания нескольких
опорных многоэлементных стандартных растворов для масс-спектрометрии,
производства Perklin-Elmer или аналогичных, содержащих разные группы элементов.
Для калибровки спектрометра используются два-три рабочих стандарта, содержащих,
например, по 10, 40 и 100 мкг/л всех элементов, за исключением ртути,
содержание которой составляет 1 и 4 мкг/л в первых двух стандартных растворах.
Стандартный раствор, содержащий по 100 мкг/л элементов, используется для
калибровки спектрометра для определения матричных элементов, таких как Na, Mg,
Al, P, K, Ca, Fe, Zn. Для более точного определения матричных элементов может
потребоваться применение стандартного раствора, в котором их концентрации были
бы одного порядка с верхними границами диапазона содержаний элементов в
исследуемом объекте, с учетом применяемого фактора разбавления. Приготовленные
рабочие растворы сохраняются в полипропиленовых центрифужных пробирках объемом
50 мл. Рекомендуется использовать рабочие стандарты для калибровки в течение 3
- 5 дней после приготовления. Пример состава рабочих калибровочных растворов
приведен в Прилож. 2.

 

13. Подготовка прибора

 

Масс-спектрометр подготавливают к работе в соответствии с
руководством пользователя (инструкцией по эксплуатации). Необходимые режимы
работы устанавливают в соответствии с рекомендациями производителя. Пример
режима проведения измерений приведен в Прилож. 3. Для конкретного типа прибора
оптимальные режимы могут быть установлены экспериментально. После запуска
прибора производят проверку рабочих характеристик прибора, включая проверку
чувствительности во всем диапазоне масс, проверку уровня фона, уровня вторичных
оксидных и двузарядных ионов, воспроизводимости (путем расчета СКО по 5 - 6
последовательным измерениям сигналов).

 

14. Коррекция спектральных

изобарных наложений, коррекция полиатомных
наложений,

вызванных матрицами образцов, реагентов и газами
плазмы,

коррекция транспортных помех

 

Коррекция трех основных видов помех в традиционном ИСП-МС анализе
с вводом жидкой пробы (без применения динамических реакционных систем)
проводится с использованием трех разных методов, отличающихся между собой как
сложностью, так и надежностью. Выявление помех при отладке методики проводится
путем определения стандартных добавок и измерением серии последовательно
разбавленных проб.

Коррекция изобарных наложений. Примеры применяемых коррекции
наложений от изобарных ионов приведены в табл. 1. В программных пакетах
современных масс-спектрометров такие процедуры коррекции предлагаются
автоматически. Точные коэффициенты коррекции определяются экспериментально.

 

Таблица 1

 

ПРИМЕРЫ ИЗОБАРНЫХ НАЛОЖЕНИЙ

 

┌──────────────────────┬────────────────┬────────────────────────┐

│  Определяемый изотоп │ Изобарный
ион  │Корректирующее
выражение│

├──────────────────────┼────────────────┼────────────────────────┤

│         74           │     
74        │          77            │

│           Ge         │       
Se      │-0,1166 x   Se         
│

├──────────────────────┼────────────────┼────────────────────────┤

│         82           │     
82        │          83            │

│           Se         │       
Kr      │-1,0078 x   Kr         
│

├──────────────────────┼────────────────┼────────────────────────┤

│        114           │     114        │         
118           │

│           Cd         │       
Sn      │-0,0273 x    Sn        
│

├──────────────────────┼────────────────┼────────────────────────┤

│        120           │    
120        │          125           │

│           Sn        
│        Te      │-0,0127 x    Te        
│

├──────────────────────┼────────────────┼────────────────────────┤

│        138           │  138    138   
│          139           │

│           Ba         │    
La,    Ce  │-0,0009 x    La,        │

│                      │                │           140          │

│                      │                │-0,00284 x    Ce       
│

└──────────────────────┴────────────────┴────────────────────────┘

 

Коррекция спектральных наложений от полиатомных ионов от разных
источников требует большего внимания. Для устранения и коррекции спектральных
наложений от полиатомных ионов в ИСП-МС применяются несколько способов. В
скобках приведены элементы, при определении которых применяется конкретный
вариант:

    - исключение из процесса пробоподготовки реагентов, вызывающих

спектральные
наложения,  например  использование  азотной  кислоты

вместо   соляной,  
которая  вызывает  образование 
хлорсодержащих

полиатомных ионов  (для 
V,  Cr,  As,  испытывающих  наложения 
от

                     +     
+

полиатомных ионов ClO ,
ArCl );

    - удаление 
компонентов,  вызывающих  полиатомные   наложения,

например,   при  
помощи   окисления   или  
упаривания  (удаление

органической  матрицы, 
мешающей  определению  Cr, 
Al,  Si  из-за

                     +   
+    +

полиатомных ионов ArC , CN
, CO );

    - учет  наложений  при 
помощи  эмпирических  соотношений 
для

                                               40  35  +

накладывающихся ионов
(например,  учет влияния   Ar 
Cl  на  массе

           40  37  +

75 по иону   Ar 
As  на массе 77 при определении
As);

    - применение метода "холодной плазмы" для  анализа 
элементов,

испытывающих  сильные 
помехи  от полиатомных ионов из
газа плазмы

                                                       56     40

(при подводимой мощности
< 900 Вт возможно определение  
Fe,    Ca

  40

и   K на уровне < 1 мкг/л в растворе);

    - применение десольватирующих устройств  для 
обезвоживания  и

высушивания  аэрозоля образца перед вводом в плазму
(метод требует

приобретения
дополнительного оборудования,