Главная страница перейти на главную страницу Serti.ru Поиск законов и стандартов на сайте поиск документов Каталог документов каталог документов Добавить в избранное добавить сайт Serti.ru в избранное
юридическая консультация правовая консультацияПолучите бесплатную юридическую консультацию по телефону | Форум о законах




goКодексы

goТехническое регулирование

goДокументы Правительства Москвы

goГТК России

goРоспатент

goГосстрой России

goТехнические комитеты

goКлассификаторы

goГосударственные стандарты России

goГосстандарт России

goГоскомэкология России

goГоскомсанэпиднадзор России

goГосгортехнадзор России

goМЧС России

goМинэнерго России

goМинтруд России

goМинтранс России

goВетеринарно-санитарные правила

goМинсельхоз России

goМинсвязи России

goМПС России

goМПР России

goСанПиН, ГН, МУК, ПДК, ОБУВ

goМинздрав России

goМВД России

goДокументы международных организаций

goПравила и порядки сертификации однородных видов продукции

goДокументы Системы сертификации ГОСТ Р

goОсновополагающие документы по сертификации

goДокументы Правительства Российской Федерации

goЗаконы Российской Федерации

goУтратили силу или отменены






Утверждаю

Главный государственный

санитарный врач Российской

Федерации - Первый заместитель

Министра здравоохранения

Российской Федерации

Г.Г.ОНИЩЕНКО

22 марта 2000 года

 

Дата введения -

1 июня 2000 года

 

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.
БИОЛОГИЧЕСКИЕ

И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ
ФАКТОРЫ

 

САНИТАРНО -
ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ

ХОЗЯЙСТВЕННОГО И
ПИТЬЕВОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

МУК 4.2.964-00

 

1.
Подготовлены коллективом авторов: Г.И. Новосильцев (к.м.н.), Н.А. Романенко
(д.м.н., академик РАЕН), В.А. Рябченко (к.б.н.), Г.С. Горяинова, Т.А. Семенова
(к.б.н.), М.Е. Батаева (к.м.н.), Ю.А. Рахманин (д.м.н., академик РАМН), Р.Э.
Михайлова (д.м.н.) - ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского Минздрава России, НИИКВОВ
АКХ им. К.Д. Памфилова, НИИЭЧиГОС им. А.Н. Сысина РАМН. Использованы материалы,
разработанные Н.А. Русановой (к.м.н.), Г.Л. Медришем (к.т.н.) - НИИКВОВ АКХ им.
К.Д. Памфилова.

2.
Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом
Российской Федерации 22 марта 2000 г.

3. С
введением настоящих Методических указаний утрачивают силу МУК 4.2.668-97
"Санитарно - паразитологическое исследование воды" и раздел
"Контроль качества питьевой воды по паразитологическому показателю
(содержание цист лямблий)", пункты 4, 5, 6 Информационно - методического
письма "О дополнительных мерах по осуществлению контроля качества питьевой
воды по микробиологическим и паразитологическим показателям" от 24 июля
1998 г. N 1100/1670-98-11.

 

1. Назначение и область применения

 

1.1.
Настоящие Методические указания устанавливают метод лабораторного исследования
качества воды хозяйственно - питьевого и культурно - бытового водопользования
по паразитологическим показателям безопасности для здоровья человека,
проводимого в порядке государственного санитарно - эпидемиологического надзора.

1.2.
Методические указания предназначены для применения в лабораториях учреждений,
осуществляющих государственный санитарно - эпидемиологический надзор, а также
ведомственный лабораторный контроль качества окружающей среды на соответствие:

-
СанПиН 2.1.4.559-96 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству
воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества";

-
СанПиН 2.1.2.568-96 "Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и
качеству воды плавательных бассейнов";

-
СанПиН 3.2.563-96 "Профилактика паразитарных болезней на территории
Российской Федерации";

-
действующим санитарным правилам по охране поверхностных вод от загрязнения.

 

2. Методика санитарно - паразитологического

исследования воды хозяйственного

и питьевого использования

 

Методика
предназначена для обнаружения в воде цист патогенных простейших кишечника
(лямблий, амебы дизентерийной, балантидия) и яиц гельминтов, представляющих
непосредственную угрозу для здоровья человека при их заглатывании, при
осуществлении контроля качества воды по паразитологическим показателям в
источниках хозяйственно - питьевого водоснабжения (поверхностных водоемах,
ручьях, каптажах, колодцах, артезианских скважинах), в распределительной сети
систем централизованного хозяйственно - питьевого водоснабжения, а также в
водоемах рекреационного назначения <*>.

    --------------------------------

<*>
Настоящая Методика не предназначена для индикации в воде ооцист криптоспоридий,
т.к. для их определения требуются более сложная подготовка диагностического
материала и использование дорогостоящих специальных тест - систем, не выпускаемых
в настоящее время отечественными производителями.

 

2.1. Принцип методики

 

Цисты
патогенных простейших кишечника и яйца гельминтов обнаруживаются при
микроскопическом исследовании осадка, получаемого после центрифугирования не
менее 4-кратно разведенного раствора флотанта с плотностью 1,26, в который
искомые паразитарные агенты попадают из осадка, смываемого с мембранных
фильтров после фильтрации через них исследуемой воды. Осаждение цист простейших
и яиц гельминтов происходит за счет резкого снижения плотности флотанта,
которая после разведения достигает 1,03 и менее, что ниже плотности
паразитарных агентов. Плотность их приводится в разделе 7.

 

2.2. Чувствительность метода

 

Метод
обладает чувствительностью с пределом обнаружения, равным единичным цистам
лямблий на 1 л. Эффективность выделения цист лямблий данным методом зависит от
исходной концентрации паразитарных патогенов в пробе, объема пробы, мутности,
обилия фитопланктона и квалификации исполнителя.

 

3. Оборудование и материалы

 

3.1. Оборудование

 

3.1.1.
Устройство для вакуумной фильтрации через мембранные фильтры: стационарное
устройство, используемое для бактериологических и химических исследований в
лабораториях водоочистных станций и центров госсанэпиднадзора: фильтровальный
аппарат АФ или "Прибор вакуумного фильтрования" ПВФ-142/ЭМ. При
отсутствии указанных стационарных установок может быть использован аппарат
Гольдмана, состоящий из воронки Гольдмана, колбы для фильтрования под вакуумом
номинальной вместимостью 2000 - 5000 мл (ГОСТ 6514-63), водоструйного насоса
(ГОСТ 10696-75) или насоса Комовского, а в полевых условиях - ручного
велосипедного насоса или других установок, прошедших гигиеническую оценку и
имеющих гигиеническое заключение.

3.1.2.
Мембранные фильтры с порами размером 3 - 5 мк и диаметром мембранного диска,
соответствующим размерам фильтровальной ячейки фильтрующего устройства, - от 35
+/- 2 мм и более. В качестве мембранных фильтров могут быть применены
фильтрующие мембраны "Владипор" марки МФАС-СПА ТУ 6-55-221-15-18-98
(предназначены для использования в приборе ПВФ-142/ЭМ), "Миллипор",
"Прагопор", "Сарториус" или другие с аналогичными
свойствами, прошедшие гигиеническую оценку и имеющие гигиеническое заключение.

3.1.3.
Лабораторная центрифуга типа ОПН-3, ОПН-8, ЦЛС-31М со сменным ротором или
другие с аналогичными параметрами, обеспечивающие 1500 - 2500 об/мин. (600 -
650 g), позволяющие центрифугировать пробы воды в центрифужных пробирках
объемом 10 - 250 мл.

3.1.4.
Холодильник электрический или газовый, поддерживающий температуру 4 - 6 град.
C.

3.1.5.
Термостат электрический типа ТС-80 или аналогичный с автоматическим
терморегулятором и термометром с ценой деления 0,2 град. C.

3.1.6.
Микроскоп биологический (типа МБИ, "Биолам" и др.), снабженный
бинокулярной насадкой (АУ-12 и др.), препаратоводителем (типа СТ-12 и др.),
имеющий объективы 10, 20, 40 и объектив 90 - 100x масляной иммерсии, а также
желательно объектив 40 - 65x водной иммерсии, обеспечивающий увеличение от 100
до 1000 крат, имеющий объектив и укомплектованный окуляр - микрометром и объект
- микрометром для калибровки первого, а также имеющий оптику фазового
контраста, расширяющую возможности дифференциации цист от фитопланктона.

3.1.7.
Осветитель ОИ-19 для микроскопа или другой аналогичный с мощностью лампы не
менее 50 ватт.

3.1.8.
Весы лабораторные для взвешивания в диапазоне 50 мг - 200 г равноплечные ручные
(аптекарские) с разновесами, ВЛР-200 и др.

3.1.9.
Денсиметры (ареометры) типа 1 (А1) с пределами измерения от 1,000 до 1,400
кг/куб. м ГОСТ 1300-74.

3.1.10.
Дозаторы пипеточные П1-0,1, П1-0,5, П1-1,0 мл ТУ 64-339-81 или аналогичные.

3.1.11.
Пинцет анатомический.

3.1.12.
Кисти мягкие из волоса белки, колонка или соболя для живописи N 12 - 18.

3.1.13.
Стаканы стеклянные высокие с носиком (ВН) номинальной вместимостью 50 - 100 мл
ГОСТ 10394-63.

3.1.14.
Пробирки центрифужные градуированные (ПЦГ) емкостью 10 мл ГОСТ 1770-64.

3.1.15.
Стекла предметные 25 x 75 мм.

3.1.16.
Стекла покровные 18 x 18, 24 x 24 мм ГОСТ 6672-59.

3.1.17.
Чашки биологические (Петри) ГОСТ 25336-82.

3.1.18.
Часы песочные на 3 - 5 мин. или часы сигнальные.

3.1.19.
Штативы лабораторные для пробирок ТУ 64-1-707-80.

3.1.20.
Емкости для отбора проб воды из нейтрального материала, пригодные для
обеззараживания принятыми методами: канистры пластмассовые емкостью 5 - 10 - 20
- 25 л, стеклянные бутыли, фляги молочные металлические емкостью 30 - 35 л,
эмалированные бидоны.

3.1.21.
Цилиндры измерительные с носиком 1 - 100, 1 - 250, 1 - 500 ГОСТ 1770-74.

3.1.22.
Колба 2-50-2, 2-100-2, 1-1000 ГОСТ 1770-74.

3.1.23.
Капельница для многократной дозировки по Манну ГОСТ 9876-61.

3.1.24.
Широкогорлые стеклянные или пластиковые флаконы емкостью 100 - 500 мл с
притертыми или завинчивающимися крышками.

3.1.25.
Спиртовка.

3.1.26.
Иглы препаровальные.

3.1.27.
Ножницы с прямыми браншами.

 

3.2. Реактивы

 

3.2.1.
Формальдегид 40%-ный (продажный).

3.2.2.
Сульфат цинка семиводный (ZnSO4 x 7H2O) х.ч.

3.2.3.
Сахароза ч.д.а.

3.2.4.
Сульфат магния (MgSO4) ч.д.а.

3.2.5.
Тиосульфат натрия ГОСТ 244-76.

3.2.6.
Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72.

3.2.7.
Натрий хлористый х.ч. ГОСТ 4233-77.

3.2.8.
Йод кристаллический х.ч.

3.2.9.
Калий йодистый (KI) х.ч.

3.2.10.
Эозин сухой х.ч.

3.2.11.
Метиленовый синий сухой х.ч.

3.2.12.
Кислота хлористоводородная (HCl) 30% х.ч.

3.2.13.
Сульфат аммония [(NH4)2SO4] х.ч.

3.2.14.
Сульфат железа [Fe2(SO4)3] х.ч.

3.2.15.
Сульфат меди (CuSO4) х.ч.

3.2.16.
Панкреатин сухой.

3.2.17.
Сода двууглекислая (Na2CO3).

 

3.3. Приготовление рабочих растворов реактивов

 

3.3.1.
Флотанты - любой из трех ниже названных:

-
33%-ный водный раствор семиводного сульфата цинка: 331 г семиводного сульфата
цинка растворяют в 1 куб. дм кипящей дистиллированной воды;

-
30%-ный водный раствор сахарозы: 300 г сахарозы ч.д.а. растворяют в 1 куб. дм
горячей (70 - 80 град. C) дистиллированной воды;

-
раствор, состоящий из смеси насыщенных растворов сульфата магния (250 г соли
растворяют в 1 л воды при температуре 80 град. C), тиосульфата натрия (300 г
соли растворяют в 1 л кипящей воды) и дистиллированной воды, соотношение
компонентов 3:3:1.

После
приготовления флотанта и снижения его температуры до 18 град. C контролируют
его удельную плотность ареометром. Для выделения цист простейших и яиц
гельминтов, представляющих непосредственную опасность заражения человека при
заглатывании с водой, удельная плотность флотанта должна быть 1,25 - 1,26. Если
величина этого показателя ниже, ее нужно откорректировать, добавляя более
концентрированные растворы соответствующих веществ.

3.3.2.
3%-ный раствор Люголя: 1,5 г йода кристаллического и 3 г калия йодистого
растворяют в 100 мл дистиллированной воды (первым растворяют калий йодистый),
выдерживают в темноте при 37 град. C в течение 3 суток, после чего используют в
работе.

3.3.3.
2%-ный водный раствор формалина: 1 часть 40%-ного формальдегида растворяют в 20
частях дистиллированной воды.

3.3.4.
Жидкость Барбагалло: 3%-ный формалин на физиологическом растворе (0,85% хлорида
натрия).

3.3.5.
1%-ный водный раствор эозина.

3.3.6.
Раствор, состоящий из 1 части метиленового синего и 50000 частей
дистиллированной воды, готовят путем последовательных разведений.

3.3.7.Смесь
(искусственный дуоденальный сок), состоящая из 0,5 г панкреатина, 0,9 г
двууглекислой соды и 5 мл дистиллированной воды.

3.3.8.
Раствор хлористоводородной кислоты 1%-ный.

 

4. Отбор и хранение проб

 

Отбор
проб питьевой воды и воды плавательных бассейнов по количеству и кратности
проводят в соответствии с СанПиН 2.1.4.559-96 "Питьевая вода.
Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого
водоснабжения. Контроль качества" и СанПиН 2.1.2.568-96 "Гигиенические
требования к устройству, эксплуатации и качеству воды плавательных
бассейнов".

Контроль
воды подземных водоисточников по паразитологическим показателям может быть
рекомендован при условии неоднократных неудовлетворительных микробиологических
результатов исследования.

Количество
проб и точек забора в распределительной сети утверждается по согласованию с
санитарно - эпидемиологической службой при разработке рабочей программы с
учетом численности водопотребителей.

Отбор
проб воды производится в чистые емкости. Сосуды больших объемов - молочные
фляги, металлические и пластмассовые ведра и т.п., которые тщательно
промываются кипяченой водой и ополаскиваются отбираемой для анализа водой.

Пробы
воды могут доставляться в лабораторию без обработки или, в целях облегчения их
транспортирования, после предварительной обработки (концентрирования материала
путем фильтрования на месте отбора проб, в лаборатории водопроводной станции и
др.).

С
этой же целью может быть использована методика первичной концентрации
паразитарных патогенов с помощью таких коагулянтов, как сульфат аммония,
сульфат железа, сульфат меди в дозе 0,1 - 0,3 г/л.

В
пробу воды на месте отбора добавляют коагулянт, затем тщательно перемешивают и
отстаивают 1 - 2 ч. После этого надосадочную жидкость удаляют, а осадок переносят
в сосуд объемом 1 л и доставляют в лабораторию. Содержимое сосуда вновь
отстаивают 1 - 2 ч, а осадок после удаления надосадочной жидкости переносят в
центрифужные пробирки 10 - 50 мл (в зависимости от объема осадка) и
центрифугируют в течение 5 мин. при 1500 об/мин. Надосадочную жидкость сливают,
а к осадку добавляют 3 мл 1%-ного раствора хлористоводородной кислоты для
растворения хлопьев коагулянта, перемешивают и центрифугируют в таком же
режиме. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок обрабатывают по нижеопис

стр.1Перейти на стр.2