Утверждаю

Главный государственный

санитарный врач

Российской Федерации

Г.Г.ОНИЩЕНКО

24 апреля 2000 года

 

Дата введения

1 июля 2000 года

 

2.3.2. ПИЩЕВЫЕ ПРОДУКТЫ И ПИЩЕВЫЕ ДОБАВКИ

 

МЕДИКО - БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПИЩЕВОЙ ПРОДУКЦИИ,

ПОЛУЧЕННОЙ ИЗ ГЕНЕТИЧЕСКИ МОДИФИЦИРОВАННЫХ

ИСТОЧНИКОВ

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

МУК 2.3.2.970-00

 

1. Разработаны Институтом
питания РАМН (Тутельян В.А. - руководитель, Аксюк И.Н., Васильев А.В.,
Воробьева Л.Ш., Высоцкий В.Г., Волгарев М.Н., Королев А.А., Кравченко Л.В.,
Маганова Н.Б., Мазо В.К., Покровская Г.Р., Сокольников А.А., Сорокина Е.Ю.,
Тышко Н.В.); Институтом вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН (Семенов
Б.Ф., Брицина М.В., Захарова Н.С.); Министерством здравоохранения РФ
(Департамент госсанэпиднадзора) (Онищенко Г.Г., Петухов А.И.); Московской
медицинской академией им. И.М. Сеченова Минздрава России (Бочков Н.П., Суханов
Б.П.); Центром "Биоинженерия" РАН (Скрябин К.Г., Кузнецов Б.Б.,
Дорохов Д.Б., Асадова Ю.Е.); Медико - генетическим центром РАМН (Шишкин С.С.);
Московским государственным университетом прикладной биотехнологии Министерства
общего и профессионального образования Российской Федерации (Рогов И.А., Кроха
Н.Г., Гурова Н.В., Сучков В.В.).

2. Утверждены 20 апреля
2000 г., введены в действие Главным государственным санитарным врачом
Российской Федерации 1 июля 2000 г.

3. Введены впервые.

 

1. Общие
положения и область применения

 

1.1. Методические
указания устанавливают требования к проведению медико - биологических
исследований пищевой продукции, полученной из генетически модифицированных
источников.

1.2. Методические
указания предназначены для учреждений санитарно - эпидемиологической службы
Российской Федерации, осуществляющих государственный санитарно -
эпидемиологический надзор, а также для других учреждений, аккредитованных на
проведение работ в этой области.

1.3. Требования,
изложенные в настоящих Методических указаниях в отношении продукции, полученной
из генетически модифицированных источников, применяются на этапах постановки на
производство, гигиенической экспертизы, государственной регистрации, закупки,
ввоза в страну и реализации.

1.4. Методические
указания разработаны с целью обеспечения единого, научно - обоснованного
подхода к оценке качества и безопасности пищевой продукции, полученной из
генетически модифицированных источников, на этапах разработки, экспертизы и
государственной регистрации этой продукции.

1.5. Производитель новой
пищевой продукции, полученной из генетически модифицированных источников,
предназначенной для реализации на территории Российской Федерации, должен
выпускать ее маркированной в соответствии с установленным порядком.

 

2.
Нормативные ссылки

 

2.1. Федеральный закон
"О санитарно - эпидемиологическом благополучии населения" от 30 марта
1999 г.

2.2. "Основы
законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан" от 22
июля 1993 г.

2.3. Федеральный закон
"О внесении изменений и дополнений в Закон Российской Федерации "О
защите прав потребителей" и Кодекс РСФСР об административных
правонарушениях" от 9 января 1996 г.

2.4. Положение о
государственном санитарно - эпидемиологическом нормировании, утвержденное
Постановлением Правительства Российской Федерации от 5 июня 1994 г. N 625.

2.5. Положение о
Государственной санитарно - эпидемиологической службе Российской Федерации,
утвержденное Постановлением Правительства Российской Федерации от 30 июля 1998
г. N 680.

2.6. Постановление
Главного государственного санитарного врача Российской Федерации N 7 от 6
апреля 1999 г. "О порядке гигиенической оценки и регистрации пищевой
продукции, полученной из генетически модифицированных источников".

 

3. Термины
и определения

 

Пищевая продукция -
продовольственное сырье, пищевые продукты и их компоненты.

Продовольственное сырье -
объекты биологического, органического и неорганического происхождения,
используемые для производства пищевых продуктов.

Пищевой продукт - продукт
животного, растительного, минерального или биосинтетического происхождения,
предназначенный для употребления в пищу человеком, как в натуральном, так и в
переработанном виде.

Компонент - вещество
животного, растительного, микробного или минерального происхождения, а также
природные или синтезированные пищевые добавки, используемые при подготовке или
производстве пищевого продукта или присутствующие в готовом продукте в исходном
или измененном виде.

Качество пищевой
продукции - совокупность характеристик, которые обуславливают потребительские
свойства, качество и безопасность пищевой продукции.

Безопасность пищевой
продукции - отсутствие опасности для жизни и здоровья людей нынешнего и будущих
поколений.

Генная инженерия - раздел
молекулярной генетики, связанный с целенаправленным созданием in vitro новых
комбинаций генетического материала (рекомбинантной ДНК), способного к
воспроизводству и функционированию в клетке - хозяине.

Генетически
модифицированный организм - организм или несколько организмов, любые
неклеточные, одноклеточные или многоклеточные образования, способные к
воспроизводству или передаче наследственного генетического материала, отличные
от природных организмов, полученные с применением методов генной инженерии и
содержащие генно - инженерный материал, в т.ч. гены, их фрагменты, или
комбинацию генов.

 

4. Порядок
гигиенической экспертизы

и
государственной регистрации пищевой продукции,

полученной
из генетически модифицированных

источников

 

4.1. Вся пищевая
продукция, полученная из генетически модифицированных источников, проходит
гигиеническую экспертизу в установленном порядке.

4.2. Проведение
гигиенической экспертизы и государственной регистрации пищевой продукции, полученной
из генетически модифицированных источников, осуществляется в соответствии с
порядком, установленным Постановлением Главного государственного санитарного
врача Российской Федерации N 7 от 06.04.99 "О порядке гигиенической оценки
и регистрации пищевой продукции, полученной из генетически модифицированных
источников".

4.3. Организация, фирма
представляют в центр санитарно - эпидемиологического нормирования,
гигиенической сертификации и экспертизы Министерства здравоохранения Российской
Федерации комплект документов и материалов, включающий:

- заявку (письмо) на
проведение гигиенической оценки и государственной регистрации пищевой
продукции, полученной из генетически модифицированных источников;

- материалы, отражающие
медико - генетическую оценку пищевой продукции, полученной из генетически
модифицированных источников;

- материалы, отражающие
технологические свойства пищевой продукции, полученной из генетически
модифицированных источников;

- материалы, отражающие
медико - биологическую оценку пищевой продукции, полученной из генетически
модифицированных источников.

4.4. Объем и программа
проведения работ по оценке качества и безопасности пищевой продукции,
полученной из генетически модифицированных источников, определяется по
результатам экспертизы представленных материалов.

4.5. Для проведения работ
по оценке качества и безопасности пищевых продуктов, полученных из генетически
модифицированных источников, фирма - изготовитель поставляет образцы продукции,
в количестве, необходимом для проведения полного объема исследований.

4.6. На основании
экспертизы представленных документов и материалов и результатов проведенных
медико - генетических, технологических и медико - биологических исследований
продукции центр санитарно - эпидемиологического нормирования, гигиенической
сертификации и экспертизы Минздрава России оформляет бланк регистрационного
удостоверения (или мотивированное заключение об отказе) и передает его на
подпись в Департамент госсанэпиднадзора Минздрава России. Регистрационное
удостоверение подписывается Главным государственным санитарным врачом
Российской Федерации, а в его отсутствие - начальником Департамента
госсанэпиднадзора, заместителем Главного государственного санитарного врача
Российской Федерации.

 

5. Медико
- генетическая оценка пищевой продукции,

полученной
из генетически модифицированных

источников

 

Необходимость проведения
тех или иных исследований по данному разделу и для каждого конкретного вида
пищевой продукции, полученной из генетически модифицированных источников,
определяется экспертом центра "Биоинженерия" РАН. Методы, описанные в
пунктах 5.1 - 5.3, являются обязательными при проведении медико - генетической
оценки пищевой продукции, полученной из генетически модифицированных
источников; методы, представленные в пункте 5.4, могут рекомендоваться как
дополнительные.

 

5.1. Rapd
анализ генотипов

Необходимое
оборудование и реактивы

 

Оборудование и
принадлежности

 

Микроцентрифужные
пробирки типа Eppendorf на 1,5 и 0,5 мл (свободные от ДНК-аз и РНК-аз фирма
Alpha)

Тефлоновый пестик и/или
стеклянная палочка под размер микроцентрифужной пробирки на 1,5 мл <*>

Настольная
микроцентрифуга типа Eppendorf (ТЭТА-20, 200000 об./мин.) <*>

Автоматические
микропипетки переменного объема (классик / студент 0,5 - 10 мкл; 5 - 40 мкл;
200 - 10000 мкл)

Наконечники для
микропипеток (наконечники "микро" и обычные)

Холодильник (охладитель
проб) <*>

Плавающий штатив -
"плотик" для микроцентрифужных пробирок

Весы до 0,5 кг

Микроанклав -
"скороварка"

Бидистиллятор

ДНК-амплификатор
("Ампли-4")

Электрофоретическое
оборудование для разделения фрагментов ДНК в агарозном геле: источник
напряжения для электрофореза (НИП 300) <*> и прибор для горизонтального
мини - электрофореза (мини - камера) <*>

УФ осветитель для
визуализации результатов электрофореза ДНК (трансиллюминатор - UVT) <*>

Зеркальная фотокамера
типа "Зенит" с оранжевым светофильтром

Фотопленка типа
"Микрат-200"

Термостат ("Темо
24-15")

Шейкер (3D)

Микровстряхиватель
пробирок типа Vortex (ТЭТА-2 или 4) <*>

РН-метр

Фитотрон для выращивания
растений (Фитотрон-99)

Настольный ламинарный
бокс (ЛБ-1)

    --------------------------------

<*> Обозначение
продукции, которая изготавливается на ООО "Biokom", Москва, Россия.

 

Необходимые реактивы и
растворы

 

Реактивы

 

Трис (hydroxymethyl)
aminometane

HCl конц.

ЭДТА

NaCl

SDS

Ацетат калия

Этиловый спирт 96%

Агароза для электрофореза

Бромистый этидий

Борная кислота

Бромфеноловый синий

Глицерин

Набор для амплификации
ДНК

(Biomaster - S.r.l. - Italy - Russia, Москва)

 

Приготовление основных
растворов

 

1 М Трис pH-7,5. Растворить
121,1 г Трис в 800 мл воды. Довести pH до необходимого значения добавлением
концентрированной HCl и довести объем до 1 л. Раствор простерилизовать.

0,5 М ЭДТА pH-8,0. К
186,1 г ЭДТА добавить 800 мл воды. Довести pH до 8,0 NaOH.

5 М NaCl (х.ч. или ч.д.а.).
29,22 г NaCl растворить в 80 мл воды и довести объем до 100 мл,
простерилизовать.

10-процентный SDS. 10 г
SDS растворить в 90 мл воды, чтобы ускорить растворение, можно нагреть раствор
до 60 град. C. Довести pH до 7,2 добавлением нескольких капель концентрированной
HCl и довести до 100 мл. Внимание! При взвешивании SDS наденьте на лицо маску,
т.к. при попадании на слизистую оболочку носоглотки этот летучий порошок
вызывает сильное раздражение.

Экстракционный буфер (200
мМ Трис-HCl pH-7,5, 250 мМ NaCl, 25 мМ ЭДТА, 0,5-процентный SDS). Для
приготовления 100 мл экстракционного буфера необходимо: 20 мл 1 М Трис-HCl
(pH-7,5), 5 мл М NaCl, 5 мл 0,5 М ЭДТА, 5 мл 10-процентного SDS. Довести водой
объем раствора до 100 мл.

5 М Ацетат калия. 49,1 г
ацетата калия растворить в 80 мл воды и довести объем до 100 мл.

70-процентный этанол. Для
приготовления 100 мл раствора требуется 73 мл 96% этанола и 27 мл воды.

ТВЕ 5Х буфер (0,089 М
Трис - основание, 0,089 М борная кислота, 0,002 М ЭДТА pH-8,0). На 1 л раствора
требуется: 54 г Трис, 27,5 г борной кислоты (ч.д.а.), 4,6 г Na2EDTAx2H20. Для
приготовления электродного буфера ТВЕ-0,5X необходимо стоковый буфер разбавить
в 10 раз дистиллированной водой.

Буфер для нанесения
образца-6X (0,25-процентный бромфеноловый синий, 30-процентный глицерин, 10 мМ
Трис-HCl, 1 мМ ЭДТА). Для приготовления 10 г буфера для нанесения требуется:
2,5 мг бромфенолового синего, 3 г глицерина, 0,1 мл Трис, 0,02 мл 0,5 М ЭДТА
pH-8,0.

Раствор бромистого этидия
(10 мг/мл). Растворить 1 г бро