sp;




Наименование растения 


Показатель    


Метод 


Литера-
турный 
источник




Брусника (листья)       


арбутин, дубильные 
вещества           


КЦР    


(62)   




Можжевельник (плоды)    


эфирное масло      


В, ГЖХ 


(62 -  
63)    




Марена красильная       
(корневище, корни)      


производные антраце-
на                 


СФ     


(62)   




Василек синий
посевной  
(цветки)                


антоцианы          


СФ     


(62)   




Хвощ полевой (трава)    


флавоновые глико-  
зиды               


ТСХ    


(62 -  
63)    




Горец птичий спорыш     
(трава)                 


флавоноиды         
(авикулярин)       


СФ, ТСХ


(62, 63)




 

Сокращения: Б - биологический, БХ - бумажная хроматография, В -
весовой, ГЖХ - газожидкостная хроматография, ВЭЖХ - высокоэффективная
жидкостная хроматография, СФ - спектрофотометрия, ФЛ - флуориметрия, ХСФ -
спектрофотометрический анализ с предварительным хроматографическим разделением
образца, ТСХ - тонкослойная хроматография, П - полярография, ПТ -
потенциометрическое титрование, Т - титрование, ХМС - хромато - масс -
спектрометрия, КЦР - качественная цветная реакция.

 

12.2. Экспериментальное изучение

функциональной активности парафармацевтиков

 

Физиологический уровень содержания действующих начал многих
парафармацевтиков в клетках и тканях организма не известен (например, биогенные
амины, олигопептиды, гликозиды, органические кислоты, сапонины и др.), равно
как и не известна физиологическая потребность в них взрослого здорового
человека. Более того, у достаточно большого количества таких БАД вообще не
идентифицированы активные компоненты, т.е. действующие начала. Примером таких
соединений могут служить экстракты, получаемые из сложных комплексов пищевых и
лекарственных растений и других видов природного сырья. Отсутствие нормы
количественного содержания в организме действующих веществ парафармацевтиков, а
также физиологической потребности в них в ряде случаев вызывает необходимость
оценки их действия на организм в целом или отдельные его системы и органы, т.е.
возникает задача исследования функциональной активности парафармацевтиков.

Назначение парафармацевтиков, состоящих из лекарственных растений
с высоким уровнем содержания высокоактивных действующих начал без четко
установленных доз и четкого знания механизмов действия, в ряде случаев может
привести к тому, что реакции компенсаторно - адаптационного характера могут
оказаться неадекватными: более сильными, чем нужно, или ослабленными. Это может
стать причиной развития последующих патологических изменений в организме. Так,
например, если при общем адаптационном синдроме секреция глюкокортикоидов
окажется чрезмерной, они будут угнетать развитие иммунологических,
неспецифических защитных реакций (воспаление), и тогда резко повышается риск
развития огромного числа заболеваний, связанных с недостаточной функциональной
активностью иммунной системы (135).

Целью данного раздела Методических указаний является выявление
влияния БАД-парафармацевтиков на показатели систем, участвующих в механизмах
развития компенсаторно - приспособительных реакций, на основании которых можно
было бы судить, в конечном счете, об эффективности некоторых видов
БАД-парафармацевтиков, которая в большинстве случаев заключается в их профилактическом
(в отношении развития патологических процессов) или общеукрепляющем действии.

 

Основные отличия БАД-парафармацевтиков от лекарств

 

а. БАД-парафармацевтики в большинстве случаев являются
источниками природных компонентов пищи, не обладающих питательной ценностью,
однако относящихся к незаменимым факторам питания - органическим компонентам
пищевых и лекарственных растений, продуктов моря и компонентов животных тканей.
Реже действующие начала БАД-парафармацевтиков могут быть получены биотехнологическими
или химическими способами. К БАД-парафармацевтикам относятся и продукты,
приготовленные на основе композиций микроорганизмов, предназначенные для
нормализации и поддержания микробиоценоза кишечника (эубиотики / пробиотики).
Действующие начала БАД-парафармацевтиков специфически поддерживают или
регулируют в физиологических пределах функции отдельных органов и систем.
Применяются исключительно "per os". Реализуются в свободной продаже
как через специальные отделы продовольственных магазинов, так и через отделы
безрецептурных средств аптек. При использовании БАД-парафармацевтиков в
качестве вспомогательных средств при диетотерапии заболеваний человека или в
качестве специфических профилактических средств перед их применением необходима
консультация врача - специалиста.

б. Эффект БАД-парафармацевтиков реализуется путем инициации
универсальных механизмов адаптационно - приспособительных реакций организма на
воздействие раздражителей самой различной природы.

в. Количественные изменения параметров функционирования систем и
органов организма лежат в пределах их физиологической нормы.

г. Широкий (гораздо более чем у лекарств) диапазон используемых
доз, при которых БАД-парафармацевтики оказывают свое нормализующее и
корректирующее действие на функции отдельных органов и систем организма
человека при отсутствии токсичных и побочных эффектов.

 

Принципы экспериментального изучения

БАД-парафармацевтиков

 

а. Учитывая комплексность и плейотропность физиологических
эффектов БАД-парафармацевтиков при изучении их эффективности, предпочтение
следует отдавать экспериментальным моделям "in vivo".

б. Исходя из абсолютной предопределенности алиментарного пути
поступления пищевых веществ все изучаемые БАД-парафармацевтики должны вводиться
при их экспериментальной оценке "per os".

в. Тестированию следует подвергать готовую к применению форму
БАД-парафармацевтика, а не отдельные компоненты, входящие в ее состав, на
уровне доз, рекомендованных для человека (используя общепринятые для этого в
токсикологии и фармакологии методики пересчета, в т.ч. на кг массы тела).

г. При оценке действия БАД-парафармацевтиков необходимо
исследовать их влияние на системы, участвующие в формировании реакций острой
фазы или общих механизмов реализации адаптационного синдрома.

 

Основные методические подходы к экспериментальной

оценке эффективности БАД-парафармацевтиков

 

Большое разнообразие адаптационных неспецифических защитно -
приспособительных реакций организма на раздражители различного рода крайне
затрудняет оценку функциональной активности БАД-парафармацевтиков на системы
сохранения динамического гомеостаза организма. Однако, как известно, все
системы, участвующие в реакциях острой фазы, тесно связаны друг с другом
посредством различного рода медиаторов, пептидов, гормонов, трофических
факторов, лимфокинов через соответствующий рецепторный аппарат (136). Иными
словами, любое изменение одной системы обязательно приводит к изменениям в
других системах. В этой связи выбор исследуемых систем диктуется набором
преимущественных эффектов БАД-парафармацевтика.

Как известно, основным эффектом БАД-парафармацевтиков является
повышение резистентности организма к инфекциям, стрессорным, агрессивным
воздействиям химической и физической природы. Такие эффекты
БАД-парафармацевтиков в большинстве случаев обусловлены положительным влиянием
их на различные звенья иммунной и детоксикационной систем организма и другие
общие механизмы адаптационно - приспособительных реакций, в т.ч. за счет
поддержания функции антиоксидантных систем организма.

Вышеизложенное позволяет констатировать, что оптимальная схема
определения функциональной активности БАД-парафармацевтиков должна включать
изучение их влияния на систему иммунитета, резистентность к стрессорным
воздействиям разнообразной природы (физическая нагрузка, длительный стресс,
химические и т.д.) и на окислительно - антиокислительный статус организма.
Правильность именно такого подхода к экспериментальной оценке эффективности
БАД-парафармацевтиков вытекает из известных и многократно доказанных учеными
разных стран фактах о том, что поражение именно этих систем лежит в основе
наиболее распространенных заболеваний человека. Взаиморегуляция нервной,
иммунной и окислительно - антиокислительной систем определяет надежность их
совместной деятельности. Нарушение же функциональной активности одной из этих
систем резко повышает риск развития функциональных расстройств общих механизмов
защитно - приспособительных реакций на воздействие факторов окружающей и
внутренней среды организма человека. Так, например, нарушение нейрорегуляторных
механизмов реализации адаптационного синдрома может играть важную роль в
патогенезе иммунологических расстройств и дизрегуляции радикальных
окислительных процессов, а иммунологические механизмы, в свою очередь, могут
участвовать в патогенезе заболеваний центральной нервной системы и формировании
окислительного стресса (136).

Учитывая это, для большей информативности и удешевления
исследований эффективности БАД-парафармацевтиков следует использовать
унифицированные экспериментальные модели. Примером может служить модель
истощающей физической нагрузки, которая кроме непосредственного изучения
адаптогенного действия БАД-парафармацевтика дает возможность исследования его
влияния на показатели иммунной (ФНО, ИЛ-2) и окислительно - антиокислительной
(МД, каталаза) систем. Использование данной модели позволяет установить
функциональную, энантиостатическую безопасность <*> (Mangum, Towle, 1977)
БАД-парафармацевтиков для здоровья человека, тем самым предопределяя
обязательность такого рода исследований.

    --------------------------------

<*> Энантиостатическая безопасность - поддержание функции.

 

В случае, когда назначение БАД-парафармацевтика предполагает
наличие какого-либо преимущественного эффекта или эффектов (радиопротекторного,
иммуномодулирующего, антиоксидантного и т.д.) необходимо дополнительное
изучение активности таких БАД в экспериментах, моделирующих соответствующие
нарушения.

Так, для определения специфических эффектов БАД-парафармацевтиков
можно использовать следующие методические подходы:

- радиопротекторного действия БАД-парафармацевтиков - мышей
облучают сублетальными дозами рентгеновского излучения (200 - 300 Рад) и
изучают влияние БАД на показатели иммунной системы, с добавлением методов
оценки пролиферативной и антителообразующей активности клеток селезенки и ОАО
системы;

- иммуномодулирующего действия БАД-парафармацевтиков - мышам
вводят циклофосамид или циклоспорин А (применение того или иного
иммунодепрессанта определяется преимущественным действием БАД на конкретное
звено иммунной реакции) и изучают влияние БАД на показатели иммунной системы с
добавлением методов определения пролиферативной и антителообразующей активности
клеток селезенки мыши;

- антиоксидантного действия - мышам вводят раствор
четыреххлористого углерода и изучают показатели ОАО системы, с добавлением
методов определения диеновой коньюгации ПНЖК и гидроперекиси липидов;

- резистентности к инфекциям - мышей заражают штаммом S.typhi и
изучают показатели иммунной системы с добавлением метода определения
неспецифической резистентности к инфекциям;

- изучение адаптогенного действия парафармацевтиков проводят на
стандартных моделях различных экстремальных условий (повышенная физическая
нагрузка, гиподинамия), а также исследуют эмоциональные поведенческие реакции
животных.

 

Лабораторные животные

 

Для изучения функциональной активности БАД-парафармацевтиков
различной природы используют мышей - самцов линии CBA/CaLacSto. Количество
животных в опытной группе следует определять с учетом используемой модели
исследования, кратности обследования животных и подсчета статистически
достоверных результатов (137). В качестве контроля используют группу здоровых
интактных мышей той же линии.

 

Модель истощающей физической нагрузки

 

Влияние на общую физическую выносливость следует определять на
мышах с помощью стандартной методики - плавания животных в бассейне с
температурой воды (20 +/- 0,5) °C. Для уменьшения вариабельности получаемых
результатов к каждой мыши подвешивают груз (5% от массы тела), не затрудняющий
движения животного.

Исследуемую добавку вводят животным внутрижелудочно за 40 мин. до
помещения их в бассейн. Контрольным животным вводят тот же объем
дистиллированной воды или физиологического раствора. Продолжительность плавания
регистрируют в секундах. Контрольную и опытную группы животных делят на две
подгруппы. Первую подгруппу мышей забивают сразу же после проведения опы