p align=right>Приложение 4.3

(Обязательное)

 

МЕТОД
АНАЛИТИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ ОСТАТОЧНЫХ

КОНЦЕНТРАЦИЙ
ПОЛИСЕПТА

 

Метод основан на
реакции полисепта с эозином. В результате взаимодействия гуанидиновых
группировок ПГМГ с эозином происходит изменение водного раствора эозина от
оранжевого до интенсивного розового цвета. Интенсивность окраски
пропорциональна концентрации полисепта. Реакция протекает при pH 3,5.

4.3.1. Аппаратура:
весы аналитические; ФЭК; кюветы с толщиной слоя 20 - 50 мм; pH-метр со
стеклянным электродом; посуда мерная стеклянная.

    4.3.2. Реактивы и
растворы квалифицированы ч.д.а.  (чистый
для

анализа): NaCl; вода дистиллированная; кислота HCl по ГОСТ
3168-77

раствор 0,1 N концентрации; эозин H (индикатор) по ТУ
6-09-183-75,

раствор массовой концентрации 0,05%; медный купорос
CuSO  по  ГОСТ

                                                        4

4265-78;  глицин  NH CH COOH ТУ 6-09-3525-74;  стандартный раствор

                    3  2

концентрации 10 мг/куб. дм.

4.3.3. Приготовление
реактивов для анализа:

    - приготовление
0,05% раствора эозина (50 мг эозина растворяют

в 
дистиллированной  воде  в мерной колбе 100 куб.  см, 
добавляют

50 мг CuSO  и доводят
до метки);

          4

- приготовление
глицинового буфера pH-3,5: в мерную колбу наливают 925 куб. см раствора N 2 и
доводят до 1 куб. дм раствором N 1 - 75 куб. см;

- раствор N 1. 0,1 N
HCl (в мерную колбу наливают дистиллированную воду, затем медленно добавляют 8
куб. см концентрированной HCl и доводят до метки 1 куб. дм);

    - раствор N 2.
7,507 г  глицина  (NH CH COOH)  и  5,85 г  NaCl

                                        3  2

растворяют в  1  куб.  
дм   дистиллированной   воды.  
Необходимо

контролировать значение pH глицинового буфера (3,5) на
pH-метре;

- приготовление
исходного раствора полисепта (концентрация 10 мг/куб. дм) 10 мг сухого
полисепта растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе на 100 мл. Затем 10
мл полученного раствора помещают в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки
дистиллированной водой.

Приготовление
стандартных разведений полисепта проводится по таблице 4.

 

                                                         Таблица 4

+----------------------------------------------------------------+

¦ 
N  ¦Количество исходного
¦Количество воды,¦Полученная концент-¦

¦колбы¦  
раствора ПГМГ     ¦    куб. см     ¦    рация ПГМГ,    ¦

¦    
¦  (10 мг/куб. дм),   ¦         
      ¦    мг/куб. дм     ¦

¦    
¦       кв. см        ¦                ¦                  
¦

+-----+---------------------+----------------+-------------------¦

¦  1 
¦          2          ¦         3      ¦          4        ¦

+-----+---------------------+----------------+-------------------¦

¦ 
1  ¦          0          ¦      10,0      ¦      0 (контроль) ¦

¦  2 
¦          0,5        ¦       9,5      ¦      0,5          ¦

¦  3 
¦          1,0        ¦       9,0      ¦      1,0          ¦

¦  4 
¦          3,0       
¦       7,0      ¦     
3,0          ¦

¦  5 
¦          5,0        ¦       5,0      ¦      5,0          ¦

¦  6 
¦          7,0        ¦       3,0      ¦      7,0          ¦

¦  7 
¦         10,0        ¦       0,0      ¦     10,0          ¦

+----------------------------------------------------------------+

 

После приготовления
растворы перемешать.

4.3.4. Проведение
анализа выполняется в следующем порядке: в приготовленные растворы полисепта
добавляют 1 куб. см глицинового буфера. Растворы перемешивают и оставляют на 5
- 10 минут для полного развития окраски; для каждого из растворов измеряют
оптическую плотность на ФЭКе (при лямбда - 535 нм).

Результаты выражают
посредством построения градуировочного графика, на котором на оси абсцисс
откладывают концентрацию полисепта, а на оси ординат значения оптической
плотности.

Количественное
определение остаточного содержания полисепта в исследуемой пробе проводят
используя колибровочную кривую, построенную на стандартном растворе полисепта.
Чувствительность метода 0,1 мг/куб. дм.