а
будет 210. Она соответствует числу 6 по таблице. Это число необходимо умножить
на то разведение, с которого начиналась первая цифра числовой характеристики,
т.е. 1х10(4).

Таким образом, количество
ацидофильных палочек в 1 см3  или
1 г исследуемого продукта составит 6х10(4).

 

7.9.7.
Определение количества ацидофильных палочек

на твердой
питательной среде

 

7.9.7.1. Из 6, 7 и 8
разведений препарата по 1 см3  вносят
в 3 стерильные чашки Петри и заливают предварительно расплавленным и
охлажденным до температуры (45±2)°С агаром с гидролизованным молоком, глюкозой
и дрожжевым автолизатом (п.6.2.8.3). Смесь хорошо перемешивают легким
вращательным движением чашки. После застывания агара, чашки Петри
перевертывают, помещают в термостат с температурой (37,0±1,0)°С и выдерживают в
течение 2-3 суток.

7.9.7.2. На питательной среде
колонии молочно-кислых палочек могут быть поверхностные и глубинные. При
поверхностном росте колонии более крупные, локонообразные, светлые или
зернистые с темным центром. Глубинные колонии - более темные, желтовато-бурые,
в виде кусочков ваты ("паучки").

Из изолированных колоний,
выросших в последнем разведении и характерных для молочно-кислых бактерий
делают препараты, окрашивают по Граму и микроскопируют.

Приготовление, окрашивание и
микроскопирование препарата проводят по п.7.11.

Клетки молочно-кислых
бактерий имеют палочковидную форму, одиночные, часто с выраженными зернами
внутри; молодые клетки могут быть темноокрашенные, одиночные или иметь вид
цепочек.

7.9.7.3. Подсчет количества
клеток ацидофильных палочек в 1,0 см3 
или 1 г продукта производят путем умножения числа выросших колоний
на соответствующее разведение, а за окончательный результат анализа принимают
среднее арифметическое результатов, полученных в 2-х параллельных посевах.

 

7.10.
Определение количества бифидобактерий

 

7.10.1.
Сущность метода

 

Метод основан на способности
бифидобактерий расти в питательных средах, разлитых высоким столбиком в
пробирках, при температуре (37±1)°С и образовывать в них через 24-72 часа
гвоздикообразные характерные колонии.

 

7.10.2.
Аппаратура, материалы и реактивы

 

Аппаратура, материалы и
реактивы - согласно п.4.

 

7.10.3.
Подготовка к анализу

 

7.10.3.1. Подготовку проб и
приготовление разведений проводят, как указано в п.5.1 и 5.2 с условием
обязательной предварительной регенерации (прогревание) буферного раствора,
применяемого для разведения продукта, в кипящей водяной бане при 100°С в
течение 20 минут с последующим охлаждением до температуры (45±2)°С.

Подготовку посуды и
материалов производят, как указано в п.5.3.

 

7.10.4.
Проведение исследований

 

7.10.4.1. Из первого
разведения исследуемого продукта, приготовленного по п.5.2, готовят последующие
- 1:100, 1:1000 и т.д., примерно до 10-го разведения с таким расчетом, чтобы
последние из них не содержали бифидобактерий.

Перемешивание продукта
производят способом, исключающим попадание пузырьков воздуха. Перемешивание
пипеткой путем вдувания и выдувания воздуха не допускается.

7.10.4.2. Перед употреблением
кукурузно-лактозную или гидролизатно-молочную среды (п.п.6.2.7.3, 6.2.7.2)
следует разогреть в кипящей водяной бане до полного расплавления агара и
выдержать при этой температуре не менее 20 минут. Перед посевом среды тотчас
следует остудить до температуры (45±2)°С погружением в холодную воду.

При определении бифидобактерий
в смешанных с молочно-кислыми бактериями культурах перед расплавлением в среду
вносят стерильный раствор неомицина (п.6.2.7.5).

7.10.4.3. Из приготовленных
разведений исследуемого продукта делают посевы по 1,0 см3  в два параллельных ряда пробирок с питательной
средой (приготовленной по п.п. 6.2.7.2, 6.2.7.3 или 6.2.7.4 соответственно) и
тщательно перемешивают способом, исключающим попадание пузырьков воздуха в
питательную среду (например, круговыми движениями руки, имитирующими
центрифугирование). Перемешивание пипеткой путем вдувания и выдувания воздуха
не допускается. Для каждого посева берут новую пипетку.

 

7.10.5.
Инкубация

 

Посевы выдерживают в
термостате с температурой (38±1)°С в течение (72±1) ч. В случае определения бифидобактерий
в смешанных с молочно-кислыми бактериями культурах - от 3 до 5 суток.
Допускается предварительный учет через (48±1) ч с последующим окончательным
учетом через (72±1) ч.

 

7.10.6.
Обработка результатов

 

7.10.6.1. На питательных
средах бифидобактерий в последних разведениях образуют изолированные
светло-коричневые колонии в виде крупинок, гречишного зерна или дисков, иногда
кометообразные, гвоздикообразные.

7.10.6.2. Из изолированных
колоний, выросших в последнем разведении и характерных для бифидобактерий,
делают препараты, окрашивают по Граму и микроскопируют.

Приготовление, окрашивание и
микрокопирование препарата проводят по п.7.11.

Клетки бифидобактерий
представляют собой грамположительные, слегка изогнутые палочки с раздвоением
или утолщением на одном-двух концах, располагаются в мазке группами или
поодиночке, в виде китайских иероглифов, могут образовывать короткие цепочки.

7.10.6.3. Подсчет количества
клеток бифидобактерий в 1,0 см3  (1
г) продукта производят путем умножения числа выросших колоний на
соответствующее разведение. За окончательный результат анализа принимают
среднее арифметическое результатов, полученных в 2-х параллельных посевах.

Для определения истинного
количества бифидобактерий в среде с неомицином результат следует удвоить.

 

7.11. Метод
микроскопирования

 

7.11.1.
Сущность метода

 

Метод основан на просмотре
окрашенных препаратов, под микроскопом для ориентировочной характеристики
микрофлоры молочных продуктов.

 

7.11.2.
Проведение анализа

 

Для приготовления препарата
на чистое предметное стекло наносят петлей небольшую каплю исследуемого
материала и распределяют на площади около 1 см2. При исследовании творога
детского и пастообразных продуктов, а также агаровой культуры на стекло наносят
каплю стерильной воды, вносят в нее петлей продукт, тщательно перемешивают и
растирают на площади 1 см2. Препарат высушивают при комнатной температуре,
фиксируют на пламени горелки и красят метиленовым голубым (п.6.1.9) или
раствором карболового кристаллического фиолетового (п.6.1.10).

 

7.11.3.
Ориентировочный состав микрофлоры

 

Ориентировочный состав
микрофлоры исследуемых продуктов представлен в табл.14.

 

Таблица 14

 ———————————————————————————————————————————————————————————————————————


|Наименование продуктов         |Ориентировочный состав
микрофлоры      |

|———————————————————————————————|———————————————————————————————————————|

|Смесь ацедофильная
"Малютка"   |Молочно-кислые
палочки                 |

|"Бифидомикс"                   |Бифидобактерии, молочно-кислые
палочки |

|                               |и
стрептококки                         |

|                               |                                       |

|"Киолакт"
адаптированный       |Молочно-кислые
палочки                 |

|                               |                                       |

|"Биолакт"
адаптированный с     |Молочно-кислые
палочки                 |

|лизоцимом                      |                                       |

|                               |                                       |

|Смесь молочная
"Крошечка"     
|Молочно-кислые палочки                
|

|                               |                                       |

|Продукт жидкий
"Кисло-молочный"|Молочно-кислые палочки, бифидобактерии |

|                               |                                       |

|Продукт жидкий
кисло-молочный  |Молочно-кислые палочки,
и стрептококки |

|"Ацидомил"                     |                                       |

|                               |                                       |

|Продукт жидкий
кисло-молочный  |Бифидобактерии,
молочно-кислые         |

|"Бифимил"                      |стрептококки                           |

|                               |                                       |

|Кефир детский                  |Молочно-кислые стрептококки
и палочки, |

|                               |единичные
дрожжи                       |

|                               |                                       |

|"Дюймовочка-1"                 |Молочно-кислые
стрептококки            |

|                               |                                       |

|"Дюймовочка-2"                 |Молочно-кислые палочки,
бифидобактерии |

|                               |                                       |

|"Дюймовочка-3"                 |Молочно-кислые стрептококки,
бифидоба- |

|                               |ктерии                                 |

|                               |                                       |

|Напиток
"Детский"             
|Молочно-кислые стрептококки и палочки 
|

|                               |                                       |

|Пастолакт                      |Молочно-кислые
палочки                 |

|                               |                                       |

|Творог
"Детский"              
|Молочно-кислые стрептококки           
|

|                               |                                       |

|Творог ДМ                      |Молочно-кислые стрептококки            |

 ———————————————————————————————————————————————————————————————————————


 

7.12. Метод
определения промышленной стерильности

питьевых
молока и сливок

 

7.12.1.
Сущность метода

 

Метод основан на способности
микроорганизмов, выдержавших стерилизацию, размножаться в стерилизованном
молоке при оптимальных режимах термостатирования и вызывать в нем
органолептические и физико-химические изменения.

 

7.12.2.
Проведение анализа для питьевых

стерилизованных
молока и сливок

 

Отобранные упаковки со
стерилизованным молоком выдерживают при температуре (37±1)°С в течение 3 суток,
а сливками - в течение 5 суток.

Образцы молока, выработанного
двухступенчатым способом, кроме того выдерживают при температуре (55±1)°С в
течение 5 суток.

По истечении срока
термостатной выдержки образцы с продуктом подвергают внешнему осмотру. При
наличии вздутия упаковки или изменении внешнего вида молока в бутылках (наличия
сгустка, отстоя сыворотки, наличия хлопьев молока и др.) упаковки считают не
отвечающими требованиям промышленной стерильности и отмечают в книге анализов.

Упаковки без внешних дефектов
вскрывают, стерилизованное молоко или сливки анализируют органолептически.
Продукт отвечает требованиям промышленной стерильности, если не установлено
изменений консистенции и вкуса продукта.

Кроме того, определяют
кислотность в термостатированных и нетермостатированных образцах, проводят
микробиологические исследования путем микроскопирования и посева 1 см3  термостатированного образца для
определения общего количества бактерий.

 

7.12.3.
Обработка результатов

 

Продукт отвечает требованиям
промышленной стерильности, есл